高效液相色譜儀與氣相色譜儀的比較
高效液相色譜儀是在經(jīng)典液柱色譜儀的基礎上,引入氣相色譜儀理論,采用高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性、應用范圍廣。高效液相色譜儀與氣相色譜儀的對比如下:
一、適用范圍:
1、氣相色譜儀:
(1) 可汽化的樣品,熱穩(wěn)定性好,沸點低。
(2)沸點高,揮發(fā)性差,熱穩(wěn)定性差,無法檢測離子和聚合物樣品。
(3) 氣相色譜儀只能分析15%~20%的有機物。
2、高效液相色譜儀:
(1)溶解后可制成溶液的樣品。
(2)分子量大,不易汽化,熱穩(wěn)定性差,可檢出高分子和離子樣品及生理活性物質。
(3)用途廣泛,占有機物的80%-85%。
2.流動相:
1、氣相色譜儀:
(1) 流動相是氣體。
(2)流動相無毒,易于操作。
(3)流動相與組分之間沒有親和力,它只與固定物相互作用,不參與分布和平衡過程。
2、高效液相色譜儀:
(1)流動相為液體。
(2) 大多數(shù)流動相都是有毒的。
(3)容易污染環(huán)境。
(4)成本較高。
(5)流動相與組分之間存在親和性,提高了色譜柱的選擇性,提高了分離度,對分離起到了很大的作用。
(6)流動相種類多,選擇余地大。
(7)流動相極性和PH值的選擇對分離有重要作用。
(8) 兩種或多種不同比例的液體可用作流動相,以提高分離選擇性。
三、固定相:
1、氣相色譜儀:種類很多。
2、高效液相色譜儀:沒有氣相色譜儀那么多的固定相。
4、色譜柱:
1、氣相色譜儀:毛細管柱可以獲得非常高的柱效。
2、高效液相色譜儀:柱子不能很長,柱效也不是很高。
5. 選擇性:
1.氣相色譜儀:流動相不影響分布。通常,通過改變色譜柱的固定相和溫度來改變選擇性。
2、高效液相色譜儀:主要靠改變流動相來改變選擇性。
6.探測器:
1、氣相色譜儀:有非常靈敏的選擇性檢測器,也有更靈敏的通用檢測器。
2、高效液相色譜儀:更靈敏的通用檢測器。
七。工作溫度:
1,氣相色譜儀:加熱。
2、高效液相色譜儀:室溫。
8、運行操作困難:
1. 氣相色譜儀:簡單。
2、高效液相色譜儀:比氣相色譜儀稍微難一點。
9、儀器制造難點:
1.氣相色譜:難度較低。
2、高效液相色譜儀:難度較大。
10. 樣品回收:
1、氣相色譜儀:破壞樣品,難以回收。
2、高效液相色譜儀:不損傷樣品,回收容易且可定量,適合大規(guī)模制備。
11. 其他:
1、高效液相色譜儀可完成較難的分離。
氣相色譜儀的流動相載氣是色譜惰性的,不參與分布和平衡過程。組分與流動相之間沒有親和力,僅與固定相相互作用。流動相與高效液相色譜的組分之間存在親和性,提高了色譜柱的選擇性,提高了分離度,對分離起到了很大的作用。兩種或多種不同比例的液體可用作流動相以提高分離選擇性。通常在室溫下操作有利于色譜分離條件的選擇。
2、凡能用氣相色譜儀分析的樣品,一般不用高效液相色譜儀。
氣相色譜儀更快、更靈敏、更方便、更便宜。
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