高壓蒸汽滅菌技術(shù)使用滅菌器加熱產(chǎn)生蒸汽。隨著蒸汽壓力的增加,滅菌器內(nèi)的溫度相應(yīng)升高,達(dá)到100 ℃ 以上的高溫。高壓蒸汽滅菌中的高壓蒸汽潛熱大,滲透力強(qiáng),傳導(dǎo)快,這可以使微生物的蛋白質(zhì)快速變性或固化,從而達(dá)到殺菌效果。高壓滅菌技術(shù)是保證實(shí)驗(yàn)室無菌操作和實(shí)現(xiàn)生物安全的基礎(chǔ)技術(shù)。高壓蒸汽滅菌技術(shù)可以有效防止雜菌污染實(shí)驗(yàn)材料,特別是在需要嚴(yán)格無菌操作的測試中,滅菌是測試成功的關(guān)鍵?,F(xiàn)將本實(shí)驗(yàn)室常用的高壓滅菌器的使用方法和注意事項(xiàng)總結(jié)如下,以供參考。
1.在實(shí)驗(yàn)室對試驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行消毒時(shí),接通電源后先觀察水位,看是否有水。要消毒的物品不應(yīng)放置得太緊。
2.高壓釜電源打開后,檢查水位是否在有限范圍內(nèi)。如果水位太低,在使用前及時(shí)補(bǔ)水至適當(dāng)范圍。
3.根據(jù)滅菌材料的需要,正確設(shè)置滅菌溫度和時(shí)間。
4.在滅菌過程中,必須先充分去除冷空氣,然后關(guān)閉放氣閥,否則鍋內(nèi)溫度無法達(dá)到規(guī)定溫度,影響滅菌效果 (非自動(dòng)滅菌器)。
5.測試設(shè)備滅菌完成后,不要直接放氣和減壓,否則瓶子里的液體會(huì)劇烈沸騰,沖洗掉瓶塞并溢出,甚至導(dǎo)致容器爆裂。只有在消毒器中的壓力降至與大氣壓相同的水平后,才能打開蓋子。
6.滅菌人員在進(jìn)行高壓滅菌時(shí),不得離開現(xiàn)場,隨時(shí)觀察儀器的運(yùn)行情況,并隨時(shí)處理情況。
7.在裝有培養(yǎng)基的試管或瓶子的棉套上,應(yīng)包括油紙或牛皮紙,以防止冷凝水進(jìn)入。
8.為保證滅菌效果,應(yīng)定期檢查滅菌效果。常用的方法是在試管中放置硫粉 (熔點(diǎn)為115 ℃) 或苯甲酸 (熔點(diǎn)為120 ℃),然后進(jìn)行滅菌試驗(yàn)。如果上述物質(zhì)熔化,高壓蒸汽滅菌器中的溫度已達(dá)到要求,滅菌效果可靠。消毒器的效果復(fù)合膜 (上面帶有溫度敏感指示器) 也可以粘貼在要消毒的物品的外包裝上。如果指示器上的顏色復(fù)合膜變化,這也表明殺菌效果是可靠的。
使用
(1) 在外鍋中加些水,將待消毒物品放入內(nèi)鍋,蓋上蓋子,對稱擰緊螺絲旋轉(zhuǎn)。
(2) 加熱使鍋內(nèi)產(chǎn)生蒸汽。當(dāng)量規(guī)手達(dá)到33.78kPa時(shí),打開排氣閥并排出冷空氣。此時(shí),儀表手下降。當(dāng)指針降至零時(shí),排氣閥將關(guān)閉。
(3) 繼續(xù)加熱,鍋內(nèi)蒸汽增加,量規(guī)手再次上升。當(dāng)鍋內(nèi)的壓力增加到所需壓力時(shí),火就會(huì)減少。根據(jù)滅菌物品的特點(diǎn),將蒸汽壓力保持在所需壓力下一段時(shí)間,然后關(guān)閉滅菌器電源或切斷火,讓它自然冷卻,然后慢慢打開排氣閥去除殘留氣體,然后打開蓋子取東西。
2.注意事項(xiàng):
(1) 待消毒物品不應(yīng)放置得太緊。
(2) 必須*排除冷空氣,否則鍋內(nèi)溫度達(dá)不到規(guī)定溫度,會(huì)影響殺菌效果。
(3) 滅菌后,不要放氣和減壓,否則瓶子里的液體會(huì)劇烈沸騰,沖洗掉瓶塞并溢出,甚至導(dǎo)致容器爆裂。只有在消毒器中的壓力降至與大氣壓相同的水平后,才能打開蓋子。
(4) 在裝有培養(yǎng)基的試管或瓶子的棉套上,應(yīng)包括油紙或牛皮紙,以防止冷凝水進(jìn)入。
(5) 為保證滅菌效果,應(yīng)定期檢查滅菌效果。常用的方法是在試管中放置硫粉 (熔點(diǎn)為115 ℃) 或苯甲酸 (熔點(diǎn)為120 ℃),然后進(jìn)行滅菌試驗(yàn)。如果上述物質(zhì)熔化,高壓蒸汽滅菌器中的溫度已達(dá)到要求,滅菌效果可靠。消毒器的效果復(fù)合膜 (上面帶有溫度敏感指示器) 也可以粘貼在要消毒的物品的外包裝上。如果指示器上的顏色復(fù)合膜變化,這也表明殺菌效果是可靠的。
(6) 現(xiàn)在有一個(gè)由微型計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)高壓蒸汽滅菌器。卸下空調(diào)后,儀器可以在恒定壓力下自動(dòng)計(jì)時(shí)。時(shí)間到了,電源會(huì)自動(dòng)切斷并鳴笛,使用非常方便。
3.用途: 是zui常用的殺菌方法。一般101.33kPa使用15 ~ 20min,可達(dá)到滅菌物品的目的。所有具有耐高溫和高濕的物品,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、玻璃設(shè)備等,都可以用這種方法進(jìn)行滅菌。
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